Q：用甲醇 (methanol) 取代乙腈 (acetonitrile)，需要留意哪些問題？

A:

分析條件：

• 分離雜質和沖提順序可能會發生變化，因此，除了目標成分的滯留時間外，還要考慮其他成分的分離圖型。
  (甲醇 (methanol) 是一種質子型溶劑，而乙腈 (acetonitrile) 是一種非質子型溶劑。質子親和力與疏水相互作用同時會影響分析。例如，對於具有提供質子的–COOH 基官能基化合物，在水/乙腈系統中 ，化合物和乙腈 (CH3CN) 中的 CN 相互吸引，可能會加速沖提，但在水/甲醇系統，這種交互作用較弱，因此沖提可能較慢。另一方面，在水/甲醇系統中，對於連接在芳環上–NH2 基團的化合物，甲醇中的氫與 –NH2 基團中氮的孤電子對相互吸引，因此沖提可能比使用水/乙腈系統更快。)
• 如果整體沖提似乎太快，並且分離效果似乎很差，請試著降低甲醇的比例。反之，如果沖提太慢，請增加甲醇的比例。
• 請參閱管柱的使用說明書，確認是否可以使用甲醇。

施加到管柱的壓力：

• 如右圖所示，使用甲醇時施加到管柱的壓力，大於使用乙腈時的壓力。例如，如果您從比例 6:4 的水和乙腈混合物改為 4:6 的水和甲醇混合物，壓力會增加 1.5 倍以上。以分析中使用流速的一半左右輸送移動相，然後在管柱的最大壓力範圍內增加流速，同時觀察效果。梯度分析需要特別小心，因為壓力可能會隨著有機溶劑比例的增加而增加。為安全起見，最好為泵浦設定「P.Max」參數。(這是進行輸送的最大壓力。如果壓力超過此設定，則輸送停止。)

UV 檢測：

• 由於在短波長區域有大量吸收，根據檢測波長的不同，基線可能難以穩定或可能有大量雜訊，高靈敏度分析必須考量這一點。

溶劑更換：

• 輸送甲醇比例高的溶劑前，為了防止鹽析出，必須先輸送一定體積的甲醇和水，按照目前使用的乙腈和水的比例混合，相當於管柱體積的 5 倍左右 (例如，在 150 mm × 4.6 mm 內徑的管柱約為 12.5 mL)，然後增加甲醇的比例。如果有機溶劑的比例相同，通常不會析出鹽，因為甲醇/水比乙腈/水的鹽溶解度更高。