Q:我想用甲醇替換管柱清洗液 (和移動相),應該使用什麼比例,設定多少的流速?
A:
請參閱管柱的使用說明書,確認是否可以使用甲醇 (methanol)。輸送甲醇比例高的溶劑前,為防止移動相 (如緩衝液) 中的鹽析出,請先輸送一定體積的甲醇 (methanol) 和水,按目前使用的乙腈 (ethanol) 和水的比例混合 (例如,在更換 10 mM 磷酸鹽緩衝液和乙腈的 4:6 混合物時,請先輸送比例 4:6 的水和甲醇混合物),相當於管柱體積的 5 倍左右,然後增加甲醇的比例。例如,如果您都是使用 60% 的乙腈進行分析,請嘗試使用 80% 的甲醇。如果甲醇的比例大於或等於乙腈的比例,則鹽通常不會析出,因為甲醇/水的鹽溶解度大於乙腈/水的鹽溶解度。
如果使用甲醇代替乙腈,壓力可能會增加。以分析中使用流速的一半左右輸送移動相,然後在管柱的最大壓力範圍內增加流速,同時觀察效果。梯度分析需要特別小心,因為壓力可能會隨著有機溶劑比例的增加而增加。為安全起見,最好為泵浦設定「P.Max」參數。(這是進行輸送的最大壓力。如果壓力超過此設定,則輸送停止。)