使用桌上型 MALDI-TOF 質譜儀量測醣蛋白的分子量

MALDI-TOF 質譜儀具備高通量及高靈敏度,如同 LCMS,可應用於眾多不同的領域,例如 LCMS。近年來,這類儀器越來越常用於量測簡單的分子量,以及分析合成產物和高分子化合物,因為這類儀器具有數項優點:可產生單電荷離子,容易辨別分子量;質量範圍大;樣品在量測前須先乾燥,方便選用各種不同的溶劑。
另方面,近年來社會情況改變,政府機關和民營企業都積極尋求降低這類應用的儀器採用和運作成本。全新推出的桌上型 MALDI-TOF 質譜儀「MALDI-8020」,正可充分滿足這類市場需求,其特色在於飛行管縮短,因此體積更為輕巧,但性能仍與常規型號相同,甚至功能更為優異。
使用 MALDI-TOF 質譜儀對轉譯後修飾調控的蛋白質量測分子量,是生物化學及分子生物學領域最基本的應用,尤其是醣蛋白的分子量,由於糖鏈結構不同,可觀察到多種成分的分子量分佈。
本文舉例說明使用桌上型 MALDI-TOF 質譜儀「MALDI-8020」,量測這類醣蛋白的分子量。

 

醣蛋白分子量的量測實例

圖 1 顯示核糖核酸酶 B (Ribonuclease B) 的胺基酸序列。已知由於發生高甘露糖 (mannose) 類型的 N-linked 型醣化,此蛋白質經過修飾,測得的主成分比原有質量高出約 1,217。將牛源性核糖核酸酶 B (5 pmol) 混合阿魏酸 (ferulic acid, 10 mg/mL,50% 乙腈/0.1% 甲酸溶液),使用 MALDI-8020 以線性模式進行分析,結果如圖 2 所示。在 m/z 14,890 處測得核糖核酸酶 B 的單電荷質子化分子訊號,與理論值 (14,899.3) 相符。此外,測得異質性糖鏈造成的分佈情形,與源自六碳糖的質量出現差異 (理論值:162)。如上所述,MALDI-8020 線性模式的解析能力、質量準確度等,與大型常規 MALDI-TOF 質譜儀在相同模式下的檢測數值相當。

Fig.1 Amino Acid Sequence and Glycosylation of Ribonuclease B

圖 1. 核糖核酸酶 B (Ribonuclease B) 的胺基酸序列與醣化

 
Fig.2 Mass Spectrum of Ribonuclease B

圖 2. 核糖核酸酶 B (Ribonuclease B) 的質譜圖

Benchtop MALDI-TOF MS "MALDI-8020"

Benchtop MALDI-TOF MS "MALDI-8020"

主要特點:

  • 線性模式 (正離子) MALDI-TOF
  • 200 Hz 固態雷射,355 nm
  • 樣品承載室快速導入樣品
  • UV 雷射離子源清潔功能 (專利)
  • 桌上型設計
  • 運轉低噪音 (<55 dB)