胜肽圖譜分析 | | 蛋白質及胜肽 LC/MS 分析

馬心肌紅蛋白分析

過去蛋白質藥物是從生物體萃取的蛋白質製成的，而近來則是利用蛋白質重組技術生產。例如胰島素、干擾素及紅血球生成素皆為已上市的重組蛋白藥物。
從品管層面而言，確認重組蛋白的表現情況很重要。對此，可以應用蛋白質定序分析胺基酸序列，及其他更快速簡易的方法，例如使用 HPLC 進行胜肽層析圖譜分析，或使用 MALDI-TOF MS 進行質譜分析。
以下簡介使用四極桿質譜儀 LC/MS 對馬心肌紅蛋白進行蛋白質分析及胜肽質量圖譜分析。

圖 1 顯示馬心肌紅蛋白經胰蛋白酶消化產物的總離子層析圖。

圖 1. 馬心肌紅蛋白經胰蛋白酶消化產物的總離子層析圖。

圖 2 顯示使用此方法檢測到的馬心肌紅蛋白胜肽胺基酸序列。除了游離離胺酸之外，涵蓋了所有肌紅蛋白胺基酸序列區域。(回收的胜肽片段在圖中標示底線。)

圖 2. 馬心肌紅蛋白胺基酸序列。

一般認為，LC/MS 可有效確認重組蛋白的表現情況，確認已知結構胜肽的結構變化，並獲得分子質量資訊，以補充蛋白質定序儀的數據。
同時使用的胺基酸組成分析，可有效確認胜肽的胺基酸組成。

高效液相層析質譜儀

• Prominence 高效液相層析質譜儀使用微量活塞幫浦送液機制，達到極佳的滯留時間再現性及高準確度的胜肽圖譜分析。
• LCMS-2020 高效液相層析質譜儀的高速掃描及正負離子切換特性，確保不會遺漏任何胜肽片段。
• LCMS-2020 的 LabSolutions工作站連結 LC 數據及 MS 數據，為胜肽質譜圖譜分析提供強大的工具。