優格中乳清酸的分析
乳清酸是一種乳清中的雜芳族化合物,也稱為嘧啶酸和尿嘧啶-6-羧酸。乳清酸以前也稱為維生素 B13,但由於是在體內合成,已不再視為一種維生素。乳清酸是核酸嘧啶的主要前驅物,因其多樣的生理作用而備受關注。
在日本,乳清酸已用於製成化妝品和藥品,作為「第 3 類非處方藥」出售,也就是副作用風險最小的非處方藥。2012 年 1 月 23 日,日本厚生勞動省藥品食品安全局發布了有關「對一系列藥品的標準進行部分修訂」的通知 (第 0123-3 號),指出:乳清酸、乳清酸鉀鹽和鎂鹽加入指定為「除非涉及療效,否則不視為藥物成分」的項目清單,因此,可以預期乳清酸在健康食品、營養補充劑等應用會增加。在此介紹範例,使用 Shimadzu Prominence HPLC 系統,透過逆相層析法分析優格中的乳清酸。
圖 1 說明乳清酸的結構式。由於乳清酸極性極高,使用逆相層析的滯留程度極低。儘管使用不含有機溶劑的緩衝溶液製備移動相,會增加滯留時間,在使用典型的逆相管柱時,滯留時間會逐漸縮短。因此在本次分析中,我們使用 YMC Co. Ltd. 設計的 Hydrosphere C18 管柱,該管柱具有去活化的矽膠表面和更高的固定相親水性,因此即使使用 100% 緩衝水溶液作為移動相,也會產生顯著的滯留。在這項應用中,我們只使用酸性緩衝溶液作為移動相。圖 2 說明透過分析乳清酸標準溶液 (10 mg/L) 獲得的層析圖,表 1 說明所使用的分析條件。
圖 3 說明使用 0.1 至 10 mg/L 的濃度獲得的校正曲線。校正曲線顯示出極佳的線性,相關係數 (R2) 大於 0.9999。
圖 4 為優格的層析圖,樣品經過超濾膜過濾後,用水稀釋 10 倍,進樣 10 µL,發現優格中的乳清酸含量約為 75 mg/L。