同步分析人類血漿中的 Remdesivir 及代謝物

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Fig. 1 External Appearance of LCMSTM-8060

圖 1. LCMS TM-8060 外觀

Remdesivir (商品名：Veklury®)是一種前驅藥，對單股 RNA 病毒具有抗病毒活性，由 Gilead Science (美國) 開發用於治療伊波拉病毒疾病。已知其部分代謝為活化的 GS-441524，這是 remdesivir 在體內的主要代謝物1). 。本文報告一套分析系統的研究結果，此系統可使用 LC/MS/MS 同步分析 remdesivir 及其代謝物，具有絕佳的選擇性 (圖 1)。

分析條件及樣品前處理

Remdesivir (P/N: C8799*) 及 GS-441524 (P/N: C8847*)為目標化合物，[U-Ring-13C6]-remdesivir (P/N: C8845*) 及 [13C5]-GS-441524 (P/N: C8855*)為其穩定同位素，購自 Shimadzu 集團旗下的 Alsachim 公司。使用 [U-Ring-13C6]-remdesivir 及 [13C5]-GS- 441524 做為內標準品。remdesivir 及 GS-441524 的結構式，如圖 2 所示。 市售人類血漿經 EDTA 2K 處理後，加入 remdesivir 及 GS-441524。接著，製作校正曲線。依據表 1 的 LC 和 MS 分析條件，及表 2 的多重反應監測 (MRM) 數據擷取參數，進行分析。分析管柱採用 Shim-pack ScepterTM C18-120 (50 mm×2.1 mm I.D., 1.9 μm) 。圖 3 為 MS 層析圖。依據 remdesivir 濃度為 100、500、1,000、2,500 與 5,000 ng/mL 的 5 個校正點以及 GS-441524 濃度為 5、25、50、250 和 500 ng/mL 的 5 個校正點，進行校正 (每一校正點 n=5)。[U-Ring-13C6]-remdesivir (2.5 μg/mL) 及 [13C5]-GS- 441524 (0.25 μg/mL) 與甲醇混合，做為內標準品 (ISTD)。

按以下順序製備樣品，加入 20 μL 75% IPA、50 μL 血漿、10 μL 內標準品及 100 μL 乙腈，混合均勻後將混合溶液離心。將離心得到的上清液轉移至 LC 小樣品瓶，進行分析。

*Alsachim 產品編號

Structural Formulas of Remdesivir and GS-441524/Fig. 3 MS Chromatograms of Remdesivir, [U-Ring-13C6]- Remdesivir (Left) and GS-441524, [13C5]-GS-441524 (Right)

 

Table 1 LC and MS Analysis Conditions/Table 2 MRM Transitions of Remdesivir and GS-441524

 

製作校正曲線

加入血漿之樣品的校正曲線，如表 3 所示。Remdesivir 及 GS-441524 在設定的校正範圍內具有良好線性。Remdesivir 及 GS-441524 在整個濃度範圍內 (包括定量下限)，精確度 (再現性) 分別為 %RSD 0.8%-1.8% 和 %RSD 2.2%-5.0%。同樣的，remdesivir 及 GS-441524 的準確度分別為 92.0%-107% 和 94.8%-106%，表示兩者的準確度皆在 100 ± 15 %。

Table 3 Linearity, Accuracy and Precision of Remdesivir and GS-441524 in Plasma Obtained from Analysis
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