nSMOL Antibody BA Kit

LC/MS/MS Sample Prep Kit for Quantitative Analysis of Monoclonal Antibodies

nSMOL (奈米表面和分子定向限制蛋白水解) 是 Shimadzu 公司專有的創新技術，可以對單株抗體的 Fab 區進行選擇性蛋白水解。nSMOL Antibody BA Kit 是一種即用型前處理組，使用免疫球蛋白收集樹脂從血液或其他生物樣本中收集單株抗體，然後以胰蛋白酶固定的奈米微粒，對這些抗體的 Fab 區進行選擇性蛋白水解。使用高性能 LCMS-8050/8060 三重四極桿液相層析質譜儀，通過 MRM 量測對有限蛋白水解產生的可變區域衍生肽進行定量。nSMOL 抗體 BA前處理組提供的無與倫比的方便和快速工作流程，顯著提高了LCMS mAb 生物分析的生產力和穩定性。

快速開發方法、成本更低
優化反應速度和定量可重複性。不需擷取抗體或配體。

nSMOL 蛋白水解
選擇性收集 Fab 胜肽，限制過量胜肽或胰蛋白酶的污染。

性能
可以對多種抗體進行高度靈敏和準確的分析。

高度多樣化
適用於多種藥用抗體。

簡易工作流程

該前處理組具有數據的高再現性，並避免與蛋白質消化相關的變異性、還原及烷基化等相關繁雜步驟。反應後無需進行固相萃取。nSMOL 製備後，樣品可以直接進樣到 LCMS 上進行分析。

套件內容物

nSMOL Antibody BA Kit提供準備好的所需試劑和方案，來進行nSMOL 方法樣品制備。

產品規格

項目	規格
檢測目標	血清或血漿中的單株抗體 (包括抗體藥物)
量測次數	100 次檢測
樣品的約略體積	90 μl (LCMS 注射前)
儲存溫度	按各種試劑指定
有效期限	如果存放在 4°C 下且未開封，則為出貨日起 18 個月 (* FG Beads^TM Trypsin DART^TM如果存放在 -80°C 下，則為出貨日起 18 個月)

產品配置

試劑	數量	容量	儲存溫度
免疫球蛋白收集樹脂	2	1.3 mL/each	4°C
洗滌 (結合) 溶液 1	1	80 ml	4°C
洗滌液 2	1	80 ml	4°C
反應溶液	1	10 ml	4°C
增強反應溶液	1	Freeze-dried	4°C
反應終止溶液	1	1 ml	4°C
FG Beads™ Trypsin DART™	1	1.1 ml	-20°C^*1

*1 如果要存放一個月以上，請存放在 -80 °C 以下的環境。

以下耗材需另外購買。

專用零件耗材	製造商	P/N
nSMOL reaction socket tube	SHIMADZU	225-32260-91 225-32260-92
Ultrafree-MC, GV 0.22 μm	Merck Millipore	UFC30GV00 UFC30GVNB
Micro tube 2mL, PP	SARSTEDT	72.708

註：其他所需設備，請參考使用說明書。

建議項目

請參考下表中的建議規格和參考產品，進行對應的準備。

所需物品	建議規格	參考產品
5 μm 過濾器	準備一個孔徑為 5 μm 的注射器和注射器過濾器。 Millex-SV 5.0 μm；PVDF，25 mm	非無菌 PVC 外殼 SLSV025NB, Merck Millipore
0.8 μm 過濾器	準備一個孔徑為 0.8 μm 的注射器和注射器過濾器。	Millex-AA 注射器過濾器裝置，0.80 μm 混合纖維素酯，25 mm，非無菌 PVC 外殼 SLAA025NB, Merck Millipore
2 mL 樣品管	・聚丙烯・圓底管	項目名稱：Safe-Lock Tubes P/N:0030 120.094 經銷商：Eppendorf
微管混合器	・在室溫或 50°C 下使用。・可安裝在保溫箱內。・套裝提供 1.5 mL 試管、2.0 mL 試管和過濾管。	項目名稱：微管混合器型號：MT-400 經銷商：Tomy Seiko Co., Ltd
保溫箱	・帶恆濕器的培養箱，或可在內部放置裝有水的托盤以保持飽和蒸氣壓的培養箱。・大到可以安裝上述微管混合器。	項目名稱：附冰櫃的保溫箱型號：MIR-254-PJ 經銷商：Panasonic Healthcare Co., Ltd.
微量移液器、吸頭	吸頭不含塑化劑，以避免 MS 產生塑化劑污染 (無色)。	(1) 品牌名稱：Rainin 經銷商：Mettler Toledo (2) 品牌名稱：Biohit 經銷商：Sartorius
桌上型離心機	能夠離心 1.5 mL 管、2.0 mL 管和 10,000 μg 和 12,000 μg 的過濾管。	產品系列名稱：MX 系列高速微量離心機經銷商：Tomy Seiko Co., Ltd
磁性管架	能夠磁性分離 FG 珠胰蛋白酶 DART	項目名稱：磁性管架型號：TA4899N12 經銷商：Tamagawa Seiki Co., Ltd.
LCMS Vials	低吸附型，或不含塑化劑的樣品瓶項目名稱：TORAST-H Bio Vial P/N：GLCTV-H-BIO	項目名稱：TORAST-H Bio Vial 經銷商：Shimadzu GLC
分析管柱	可進行胜肽分離和分析	項目名稱：Shim-pack GISS 內徑2.1 mm × 長度 50 mm，粒徑 1.9 μm P/N:SSOT 227-30048-01 經銷商：Shimadzu Corporation
內標溶液	能夠進行靈敏度和滯留時間校正	項目名稱：ProteoMass P14R MALDI-MS standard 型號：P2613 經銷商：Sigma-Aldrich

影片

nSMOL - How Nano Technology and LC-MS Improved Speed and Accuracy of mAb Bioanalysis

液相層析質譜儀
nSMOL Antibody BA Kit

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